سیل میں خلل ڈالنے والا کیسے کام کرتا ہے۔

خلیے میں خلل ڈالنے والا ایک عام استعمال شدہ تجرباتی آلہ ہے جو حیاتیاتی خلیوں کو توڑنے اور انٹرا سیلولر مادوں کو جاری کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔سیل بریکر کا کام کرنے والا اصول جسمانی توڑنے اور مکینیکل دوغلے کے اصول پر مبنی ہے، اور سیل توڑنے کا مقصد خلیات کی ساخت کو تباہ کرنے کے لیے کافی توانائی فراہم کر کے حاصل کیا جاتا ہے۔

سیل ڈسپوٹر کے کام کرنے والے اصول کو ذیل میں تفصیل سے متعارف کرایا جائے گا۔سیل ڈسپوٹر کے اہم اجزاء میں اسپیڈ کنٹرولر، کرشنگ چیمبر، کرشنگ بال اور ایک نمونہ پائپ لائن وغیرہ شامل ہیں۔ ان میں سپیڈ کنٹرولر کرشنگ چیمبر کی گردش کی رفتار کو کنٹرول کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے جو کہ ذخیرہ کرنے کے لیے ایک کنٹینر ہے۔ نمونے اور کچلنے والی گیندیں، اور کچلنے والی گیندیں نمونوں سے ٹکرا کر خلیات کو توڑ دیتی ہیں۔سیل میں خلل ڈالنے والے کو استعمال کرنے سے پہلے، مناسب خلل ڈالنے والے میڈیم کو پہلے منتخب کیا جانا چاہیے۔عام طور پر استعمال ہونے والے کرشنگ میڈیا شیشے کے موتیوں، دھاتی موتیوں اور کوارٹج موتیوں کی مالا ہیں۔

کرشنگ میڈیم کو منتخب کرنے میں اہم باتیں نمونے کی نوعیت اور کرشنگ کا مقصد ہیں۔مثال کے طور پر، نازک خلیات کے لیے، چھوٹے شیشے کے موتیوں کو رکاوٹ کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔زیادہ مشکل خلیات کے لیے، سخت دھاتی موتیوں کا انتخاب کیا جا سکتا ہے۔کرشنگ کے عمل کے دوران، نمونے کو کرشنگ بن میں ڈالیں، اور کرشنگ میڈیم کی مناسب مقدار شامل کریں۔اس کے بعد، کرشنگ چیمبر کی گردش کی رفتار کو اسپیڈ کنٹرولر کے ذریعے کنٹرول کیا جاتا ہے، تاکہ کرشنگ میڈیم اور نمونے میں مسلسل مکینیکل تصادم ہو۔یہ تصادم توانائی کی منتقلی، خلیے کی جھلیوں اور آرگنیلز کو منتشر کرنے اور انٹرا سیلولر مواد کو جاری کرنے کے ذریعے خلیے کی ساخت میں خلل ڈال سکتے ہیں۔

سیل ڈسپوٹر کے کام کرنے کے عمل میں بنیادی طور پر درج ذیل اہم عوامل شامل ہیں: گردش کی رفتار، کرشنگ میڈیم کا سائز اور کثافت، کرشنگ کا وقت اور درجہ حرارت۔پہلی گردش کی رفتار ہے۔گردش کی رفتار کے انتخاب کو سیل کی مختلف اقسام اور نمونے کی خصوصیات کے مطابق ایڈجسٹ کرنے کی ضرورت ہے۔

عام طور پر، نرم خلیوں کے لیے، تصادم کی فریکوئنسی کو بڑھانے کے لیے زیادہ گردش کی رفتار کا انتخاب کیا جا سکتا ہے اور اس طرح خلیات کو زیادہ مؤثر طریقے سے روکا جا سکتا ہے۔سخت خلیوں کے لیے، چونکہ وہ زیادہ سخت ہوتے ہیں، اس لیے نمونے کی رکاوٹ کو کم کرنے کے لیے اسپن کی رفتار کو کم کیا جا سکتا ہے۔

دوسرا کرشنگ میڈیم کا سائز اور کثافت ہے۔کرشنگ میڈیم کا سائز اور کثافت براہ راست کرشنگ اثر کو متاثر کرے گی۔چھوٹا خلل ڈالنے والا میڈیا زیادہ تصادم پوائنٹس فراہم کر سکتا ہے، جس سے سیلولر ڈھانچے میں خلل ڈالنا آسان ہو جاتا ہے۔بڑے کرشنگ میڈیا کو زیادہ کرشنگ وقت درکار ہوتا ہے۔

اس کے علاوہ، کرشنگ میڈیم کی کثافت بھی تصادم کی قوت کو متاثر کرے گی، بہت زیادہ کثافت نمونے کے بہت زیادہ ٹکڑے ہونے کا باعث بن سکتی ہے۔خلل کا وقت سیل میں خلل کے لیے ایک اہم پیرامیٹر ہے۔کرشنگ وقت کا انتخاب نمونے کی قسم اور کرشنگ اثر کے مطابق کیا جانا چاہئے۔عام طور پر، خلل کا وقت جتنا لمبا ہوتا ہے، خلیات میں خلل اتنا ہی زیادہ ہوتا ہے، لیکن یہ نمونے کے دوسرے حصوں کو بھی نقصان پہنچا سکتا ہے۔آخری درجہ حرارت کنٹرول ہے۔سیل کے ٹکڑے ہونے پر درجہ حرارت کے اثر کو نظر انداز نہیں کیا جا سکتا۔ضرورت سے زیادہ درجہ حرارت خلیوں میں پروٹین اور نیوکلک ایسڈ کی کمی کا سبب بن سکتا ہے، اس طرح ٹکڑے ٹکڑے ہونے کا اثر متاثر ہوتا ہے۔لہذا، کرائیوجینک حالات کے تحت سیل میں خلل کو انجام دینے کی سفارش کی جاتی ہے، جسے چلر استعمال کرکے یا برف پر کام کرکے کم کیا جاسکتا ہے۔

خلیے میں خلل ڈالنے والے حیاتیاتی تحقیق میں اہم کردار ادا کرتے ہیں۔گردشی رفتار، سائز اور کرشنگ میڈیم کی کثافت، کرشنگ ٹائم اور درجہ حرارت جیسے پیرامیٹرز کو معقول طور پر کنٹرول کرکے، سیلز کی موثر کرشنگ حاصل کی جا سکتی ہے۔خلیات کے ٹوٹ جانے کے بعد، خلیات میں مختلف قسم کے مادے حاصل کیے جاسکتے ہیں، جیسے کہ پروٹین، نیوکلک ایسڈ، انزائمز وغیرہ، جو بعد کے تجزیے اور تحقیق کے لیے ایک اہم بنیاد فراہم کرتے ہیں۔مختصراً، سیل میں خلل ڈالنے والا ایک اہم تجرباتی آلہ ہے، اور اس کا کام کرنے والا اصول جسمانی ٹوٹنے اور مکینیکل کمپن کے اصول پر مبنی ہے۔خلیات کی مؤثر رکاوٹ مختلف پیرامیٹرز جیسے گردش کی رفتار، سائز اور خلل کے درمیانے درجے کی کثافت، خلل کا وقت اور درجہ حرارت کو کنٹرول کرکے حاصل کی جاسکتی ہے۔سیل میں خلل ڈالنے والا وسیع پیمانے پر استعمال ہوتا ہے، جو حیاتیات کے شعبے میں متعلقہ تحقیق میں محققین کو سہولت اور مدد فراہم کرتا ہے۔